Статьи автора

Подход для анализа внутриклеточных маркеров в фосфатидилсерин-положительных тромбоцитах

Номер выпуска 1 от 01.01.2025

Фосфатидилсерин (ФС)-положительные тромбоциты играют важную роль в тромбозе и гемостазе. Они имеют высокую прокоагулянтную активность, способность к везикуляции и могут агрегировать с активированными ФС-отрицательными тромбоцитами. Они обнаруживаются в растущем тромбе in vitro, однако остается ряд загадок, связанных с ними. В частности, внутриклеточная сигнализация и реорганизация цитоскелета в этих тромбоцитах исследованы очень слабо, поскольку они разрушаются при пермеабилизации, необходимой для проникновения антител к внутриклеточным маркерам. В данной работе мы предлагаем подход, который позволяет анализировать внутриклеточные маркеры в индуцированных кальциевым ионофором А23187 ФС-положительных тромбоцитах с помощью проточной цитометрии или конфокальной микроскопии. Мы использовали наиболее мягкую пермеабилизацию фиксированных ФС-положительных тромбоцитов с помощью сапонина и показали, что такая пермеабилизация позволяет в значительной мере сохранить ФС-положительные тромбоциты. Для примера мы проанализировали состояние полимеризованной формы актина в ФС-положительных тромбоцитах и показали, что несмотря на значительную перестройку цитоскелета, происходящую при активации в таких тромбоцитах, актин в них частично представлен в полимеризованной форме.

115 0